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TYPE DE DIPLOME : Formation qualifiante

FQ La Cytométrie en flux 2 : de l'analyse au tri

Domaine : Sciences, Technologies, Santé
 
Spécialité : Cytométrie en flux
  • Faculté

    Faculté des Sciences

Présentation

Référence formation (à rappeler dans toute correspondance) :

Responsable(s) de l'enseignement : 

Forme de l'enseignement : en présentiel

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Objectifs

Proposer un enseignement interactif et évolutif en fonction des besoins spécifiques des participant.e.s.

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Compétences visées

Connaissance des techniques avancées de cytométrie. Savoir réaliser un tri cellulaire sur un trieur FACS ARIAIII. Savoir analyser des marquages polychromatiques. Savoir réaliser et analyser une expérience à base de billes cytométriques (CBA et/ou Luminex). Savoir réaliser le contrôle qualité des cytomètres BD.
Possibilité de mettre en oeuvre des techniques supplémentaires à la demande des participant.e.s (prendre contact avec le responsable au moins 4 semaines avant le début de la formation).
Les aspects concernant la sauvegarde des données peuvent être traités.

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Programme

Référence formation :

Volume horaire : 35 heures

Rythme : 5 jours

Lieu : locaux Université de Paris

CONTENUS PÉDAGOGIQUES

  • Partie théorique (10h)
    • Les bases de la cytométrie : Fluidique • Lasers et détecteurs de morphologie cellulaire • Fluorochromes et détecteurs de fluorescence • Compensations •Les contrôles isotypiques • Analyses • Soft • Contrôle qualité
    • Les champs d’application de la cytométrie
    • • Marquage phénotypique (surface et intracellulaire) • Cycle cellulaire-Apoptose-Anomalies chromosomiques • Réactions d’oxydation-Signal calcique-Marquage d’organelles • Nouvelles applications : analyse de la transduction du signal/Fluorescent Bar Coding/Mesure d’analytes solubles/Imaging des cellules en flux/Cytométrie de masse • Fluorescent Activated Cell Sorting
  • Partie pratique (25h)
    • Des splénocytes stimulés in vitro seront mis à disposition des participants.
    • Un marquage CFSE ayant été réalisé avant le début de la stimulation, il sera possible d’étudier le nombre de cycles cellulaires effectués par ces cellules en fonction de diverses conditions de culture. Les cytokines présentes dans les surnageants de ces cultures seront étudiées par CBA. Des sous-populations spléniques seront triées par cytométrie en flux.
    • Marquages polychromatiques ≥ 6 couleurs sur BD LSRII avec traitement des compensations
    • Cytometric Bead Arrays et lecture sur Luminex ou FACSARRAY
    • Tri cellulaire sur trieur BD ARIA III
    • Procédures de maintenance
    • Contrôle qualité des cytomètres
    • Analyses
    • Présentations orales
    • Table ronde et debriefing 

Des modifications mineures peuvent être apportées sous la
responsabilité de l’encadrement pédagogique.

MOYENS PÉDAGOGIQUES ET TECHNIQUES D’ENCADREMENT

Équipe pédagogique :

Ressources matérielles :

  • Supports pédagogiques format PDF sur clé USB
  • BD Fortessa 15 couleurs 4 lasers
  • BD LSRII 19 couleurs 3 lasers
  • BD ARIA III 15 couleurs 5 lasers
  • C6 4 couleurs 2 lasers
  • BioPlex 200 Bio-Rad
  • Postes d’analyse déportés

Afin de favoriser une démarche interactive et collaborative, différents outils informatiques seront proposés pour permettre :

  • d'échanger des fichiers, des données
  • de partager des ressources, des informations
  • de communiquer simplement en dehors de la salle de cours et des temps dédiés à la formation.

MOYENS PERMETTANT DE SUIVRE L’EXÉCUTION DE L’ACTION ET D’EN APPRÉCIER LES RÉSULTATS

Au cours de la formation, le stagiaire émarge une feuille de présence par demi-journée de formation en présentiel et le Responsable de la Formation émet une attestation d’assiduité pour la formation en distanciel.

À l’issue de la formation, le stagiaire remplit un questionnaire de satisfaction en ligne, à chaud. Celui-ci est analysé et le bilan est remonté au conseil pédagogique de la formation.

Un questionnaire d’évaluation à froid est également envoyé au prescripteur de la formation (sous 6 mois), afin d’assurer un suivi sur l’impact de la formation sur le poste de travail.

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Contrôle des connaissances

Attestation : à l'issue de la formation, il est remis un certificat de réalisation, attestant de l'acquisition des compétences.

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Admission

Public cible

  • Technicien.ne.s,
  • ingénieur.e.s,
  • chercheur.e.s

des entreprises et des collectivités dans le domaine des sciences du vivant.

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Pré-requis

Avoir de solides bases en cytométrie et être en charge de l’animation d’un plateau technique ou d’une plate-forme de cytométrie.

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Les clefs de la réussite

Après une remise à niveau, les encadrant.e.s chercheront à répondre aux attentes des participant.e.s.

Le site de formation permet de mettre en oeuvre des expériences de marquages polychromatiques (Fortessa 15 couleurs), de tri cellulaire en tubes/plaques/lames (ARIA III), sur billes cytométriques à façon (Bioplex 200). Des expériences de cytométrie fonctionnelle peuvent être menées (flux calcique, cycle cellulaire, etc). Un Accuri C6 est également disponible sur le plateau technique.

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Droits de scolarité

FRAIS DE FORMATION* 2500 €

*Les tarifs des frais de formation sont sous réserve de modification par les instances de l’Université.

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Contacts

  • Reine RIGAULT

    Contact administratif
    • 01 57 27 82 34
    • reine.rigault@u-paris.fr

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