Faculté
Faculté des Sciences
Présentation
Objectifs
Connaissance de la pratique et des aspects théoriques de la séparation des molécules par les différents types d’électrophorèse.
Compétences visées
Savoir choisir et mettre en oeuvre le.s type.s d’électrophorèse adéquat.s en fonction des informations recherchées et de la protéine d’intérêt.
Programme
Partie théorique (3 h)
Structure des protéines et technique d’électrophorèse
La partie théorique porte sur la description et la compréhension de la nature et de la structure des gels d'électrophorèse (conditions natives et dénaturantes). Elle traite également des phénomènes de migration des molécules (des protéines, en particulier) dans ces différents types de gel. Les différentes informations obtenues par cette technique (masse moléculaire apparente des protéines, interactions protéine/protéine, informations structurales, etc.) seront également traitées.
Partie pratique (14 h)
Matériel utilisé/préparation de gels natifs et gels dénaturants et échantillons (4h)
Mise en œuvre des techniques : migrations et diverses colorations (7h)
Analyse des résultats (3h)
La partie pratique permet de réaliser des gels d'électrophorèse en conditions dénaturantes et natives.
- en conditions dénaturantes (SDS-PAGE) : des gels de réticulation variée (8% à 16% d’acrylamide) seront coulés et utilisés pour faire migrer différents types de protéines.
Plusieurs méthodes de révélation des protéines seront utilisées : bleu de Coomassie, nitrate d’argent et/ou SYPRO-Ruby.
Des essais de renaturation des protéines en gel seront réalisés et la renaturation sera testée par activité enzymatique sur gel.
- en conditions natives (Native-PAGE) : des conditions de pH variables seront testées pour couler les gels et 3 protéines différentes seront déposées sur les gels.
La révélation se fera par mise en évidence de l’activité enzymatique des protéines sur gel.
Durée de la formation:
Du 10 au 12 mai 2021
2.5 jours / 17 heures
1200 €
(TVA 0% incluse)
Contrôle des connaissances
MOYENS PERMETTANT DE SUIVRE L’EXECUTION DE L’ACTION ET D’EN APPRECIER LES RESULTATS:
Liste d’émargement
A l’issue des expérimentations, l’analyse et la discussion des résultats obtenus dans les différentes conditions expérimentales testées seront faites afin de permettre aux participant.e.s de pouvoir faire le lien entre la partie théorique et la partie pratique de la formation et ainsi définir les conditions expérimentales adaptées à l’échantillon à analyser.
Questionnaire de satisfaction
MODALITES D’EVALUATION:
Attestation de formation délivrée par l’Université
Aménagements particuliers
MOYENS PEDAGOGIQUES ET TECHNIQUES D’ENCADREMENT:
Ressources humaines :
Enseignant.e.s-chercheur.e.s de l’Université Paris Diderot
Ressources matérielles :
Supports pédagogiques format PDF sur clé USB
Admission
Public cible
Technicien.ne.s, ingénieur.e.s, chercheur.e.s des entreprises et des collectivités dans les domaines des sciences du vivant.
Conditions d’ouverture : 6 inscriptions minimum et 12 maximum.
Pré-requis
Avoir des connaissances de base (académiques ou par acquis d’expérience) sur la structure et les fonctions des protéines.
Droits de scolarité
1200 €
Contacts
Reine Rigault
Contact administratif- 01 57 27 82 34
- fcsdv@u-paris.fr
Nathalie Demont-Caulet
Coordinateur pédagogique- nathalie.demont-caulet@inra.fr
