Durée
35 heures
Faculté
Faculté des Sciences
Présentation
Référence formation : FQ-S30CYTO2
Responsable(s) de l'enseignement : Pr A. Nicoletti – Dr M. Le Borgne
Forme de l'enseignement : en présentiel
6 personnes formées sur les 5 dernières années
Objectifs
Connaitre et maîtriser les techniques avancées de cytométrie en flux comme le tri cellulaire et l’analyse de billes cytométriques (cours théorique et travaux pratiques).
Compétences visées
A l'issue de la formation, l'apprenant est capable de:
- Maîtriser le tri cellulaire sur Trieur Aria III
- Réaliser et analyser une expérience à base de billes cytométriques (CBA et/ou Luminex).
- Réaliser le contrôle qualité des cytomètres BD.
- Possibilité de mettre en œuvre des techniques supplémentaires à la demande des participant.e.s
Ils en parlent
« Très bonne approche théorique et pratique. Permet de comprendre les bases de la technique pour une bonne pratique et l'analyse des résultats »
Programme
Référence formation :FQ-S30CYTO2
Volume horaire : 35 heures sur 5 jours
Rythme: 7 heures par jour
Lieu : Plateforme de cytométrie du LVTS INSERM U1148, Site Hôpital Bichat, 46 rue Henri Huchard, 75018 Paris
CONTENUS PÉDAGOGIQUES
Partie théorique (10h)
- Les bases de la cytométrie (Introduction ; Fluidique ; Lasers et détecteurs de morphologie cellulaire ; Fluorochromes et détecteurs de fluorescence ; Compensations ; Les contrôles isotypiques ; Analyses ; Soft ; Contrôle qualité)
- Les champs d’application de la cytométrie (Marquage phénotypique (surface et intracellulaire) ; Cycle cellulaire ; Apoptose-Anomalie chromosomiques ; Réactions d’oxydation-Signal calcique-Marquage d’organelles ; Nouvelles applications : analyse de la transduction du signal/Fluorescent Bar Coding / Mesure d’analytes solubles / Imaging des cellules en flux/Cytométrie de masse ; Fluorescent Activated Cell Sorting
Partie pratique (25 heures)
- Analyse de la prolifération cellulaire de splénocytes murins stimulés et marqués au CFSE
- Analyse de marquages polychromatiques ³ 6 couleurs sur BD LSRFortessa X-20.
- Dosage de cytokines dans des surnageants de culture avec des billes cytométriques (lecture sur Luminex).
- Tri de sous-populations spléniques sur trieur BD Aria-III
- Procédures de maintenance et contrôle qualité des cytomètres
- Analyses
- Présentations orales, table ronde et debriefing le dernier jour
MOYENS PÉDAGOGIQUES ET TECHNIQUES D’ENCADREMENT :
Responsable pédagogique : Pr Antonino Nicoletti est professeur des université Spécialisé en immunologie.
Responsable pédagogique :Dr Marie Le Borgne est maître de conférences Spécialisée en immunologie.
Ressources matérielles
- Des splénocytes murins stimulés et marqués au CFSE ou marqués avec des anticorps (marquage polychromatique ³ 6 couleurs) et des surnageant de culture seront mis à la disposition des stagiaires.
- Cytomètres : BD LSRFortessa X-20 15 couleurs 4 lasers ; BD ARIA-III 15 couleurs 5 lasers ; BD Accuri C6 4 couleurs 2 lasers.
- Lecteur de billes cytométriques : Biorad Bio-plex 200
- Analyse des résultats sur postes informatiques équipés du Logiciel des logiciels BD Diva.
- Supports pédagogiques format PDF sur clé USB.
Contrôle des connaissances
Attestation : à l'issue de la formation, il est remis un certificat de réalisation, attestant de l'acquisition des compétences.
Aménagements particuliers
Admission
Public cible
- Technicien.ne.s,
- ingénieur.e.s,
- chercheur.e.s
des entreprises et des collectivités dans le domaine des sciences du vivant.
Pré-requis
Aucun prérequis nécessaire hormis les diplômes liés aux titres que doivent détenir les futurs inscrits (cf. personnes autorisées à s'inscrire dans la rubrique "Public cible").
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Les clefs de la réussite
Des fiches pratiques sont à votre disposition sur la page http://www.reussir-en-universite.fr/index.html.
Modalités de candidature
Contacter Reine Rigault pour les inscriptions : reine.rigault @ u-paris.fr
Droits de scolarité
FRAIS* DE FORMATION :
Pour toute personne bénéficiant d’une prise en charge totale ou partielle : 2500 €
Pour toute personne finançant seule sa formation : 1 150 €
*Les montants des frais de formation sont sous réserve de modification par les instances de l’Université.
Contacts
Dernière mise à jour le 3 juin 2022
